细胞用siRNA干扰处理后，会影响RT-PCR结果吗？

1. 细胞用siRNA干扰处理后，会影响RT-PCR结果吗？

siRNA既能抑制mRNA的翻译，又能直接作用于mRNA将其分解，推荐阅读siRNA的相关机制以了解细节。

2. 一般siRNA干扰细胞后多久去做流式检测凋亡

这个取决于你具体的实验。一般都是转染后检测多个时间点。看最佳效果出现在哪个时间，后面的检测就都在这个时间点来做。

3. 10cm细胞培养皿可以做siRNA干扰吗，需要多

1平方米＝10000平方厘米,

一个圆柱的体积是3×3×π ×10=282.6平方厘米

10000÷282.6≈ 35.39      取最小的整数位，35

每平方米的纸最多能做35个薯片盒的侧面包装纸.

4. 用sirna处理细胞，会不会蛋白水平没降低，rna水平降低

但如果一种增加,另外一种则降低.这往往与RNA或蛋白在细胞内的稳定性相关.如果某种RNA稳性性差,易降解,则易出现RNA降低,而蛋白表达增加；如果某种蛋白质稳定性也差,则易出现蛋白表达降低,而RNA增加.
对付专家的解释尽可能地提供几种可能性.

5. 求助做SiRNA质粒转染，效率低转染后细胞状态差

可以用病毒转染～效率会提高很多～

6. sirna干扰序列不同种群能混用吗

在RNA干扰实验中 首先需要构建dsRNA表达载体 将这种载体导入受体细胞中后 表达产生的dsRNA在DICER酶作用下形成siRNA 引起具有相同序列的mRNA发生讲解 导致细胞或个体不能合成相应的蛋白质

7. 10cm细胞培养皿可以做siRNA干扰吗，需要多大量的siRNA和lipo 2000呢？

当然可以啊，要多少lipo2000是根据细胞种类来看的，有些细胞对lipo2000毒性的耐受力差，就不能多用。我知道的HEK 293细胞一般可以用到30ul的lipo2000，而siRNA的用量一般是1ug/1ul lipo2000.

8. sirna转染后多长时间提rna

三到五小时。
siRNA (Small interfering RNA)，是一种小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员，激发与之互补的目标mRNA的沉默。